2025年3月,青海大学藏羊产业科技创新团队在期刊《Food chemistry》上发表题为“Potential mechanism of dietary palm kernel meal effect on muscle tenderness in Tibetan sheep revealed by proteomics and phosphorylated proteomics”的研究成果,该研究基于蛋白质Label free技术和4D-Label free方法分析了ZL-0组和ZL-18组藏羊肉的差异蛋白及磷酸化差异蛋白,阐明藏羊肌肉中调控嫩度的关键蛋白及其所涉及到的代谢通路,揭示了PKM调控藏羊肉嫩度的潜在分子调控网络。
采用无标记蛋白质组学技术和4D无标记磷酸化蛋白质组学技术,系统分析肌肉嫩度的蛋白质表达调控机制。通过蛋白质组学数据分析筛选出59个差异表达蛋白。磷酸化蛋白质组学分析显示,有681个修饰肽段水平发生变化,其中235个修饰肽段水平对应132个上调蛋白,446个修饰肽段水平对应253个下调蛋白。
随后,通过双组学分析进一步预测,嫩度的调控机制主要基于糖酵解,通过调节线粒体自噬、细胞凋亡以及AMPK和HIF-1信号通路来调控肌肉嫩度。具体表现为:通过调节 Ca²⁺释放,促进相关蛋白质对肌原纤维蛋白的降解;缩短屠宰后肌肉糖酵解过程,降低肌肉糖酵解程度。
这一结论通过蛋白质免疫印迹(WB)实验得到验证,P53、ENO5、ALDOA、ENDOG 和 PINK1 被确定为嫩度调控的潜在因子。
图1 蛋白质组学数据表征
图2 磷酸化蛋白质组学数据的表征
图3 KEGG通路注释和富集分析
图4 蛋白质和磷酸蛋白的蛋白质相互作用网络分析